Yazar "Erharman, Ahmet" seçeneğine göre listele

Listeleniyor 1 - 1 / 1
  • Küçük Resim
    Öğe
    Sıçan Kuyruğundan Ultra Hızlı Ekstraksiyon Yöntemiyle Tip I Kolajenin Eldesi ve Saflaştırılması
    (Selçuk Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü, 2022) Erharman, Ahmet; Eryılmaz Doğan, Esma
    Kolajen, çok hücreli hayvanlarda en çok bulunan proteindir ve lifli bir yapıya sahiptir. Kozmetik cerrahi, dermal enjeksiyonlar, kemik aşılama, rekonstrüktif cerrahi gibi uygulamalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu uygulamalarda kullanılan kolajen, mevcut kaynaklardan geleneksel kolajen ekstraksiyon yöntemleri ile elde edilmekte veya ticari kolajen kaynaklarından temin edilebilmektedir. Geleneksel ekstraksiyon yöntemlerinin uygulanması yaklaşık on gün sürmektedir ve ticarileşmiş kolajen kaynakları ise ekonomik olarak maliyetlidir. Bu durum geleneksel ekstraksiyon metotlarına ilave olarak güçlü çalkalama ve santrifüj filtrasyon teknikleriyle geleneksel ekstraksiyon metoduna nispeten yaklaşık 3 saatte tamamlanabilen ultra hızlı kolajen ekstraksiyon yöntemlerinin önemini ortaya çıkarmıştır. Bu çalışmada erişilebilirliği ve kolajen verimliliği yüksek olan sıçan kuyruğu kolajen kaynağı olarak seçilmiştir. Geleneksel ekstraksiyon tamponları ile çalkalama adımları birleştirilerek ekstraksiyon süresi azaltılmaya çalışılan bu yöntemle, az miktardaki (yaklaşık 5 g) numuneden yüksek oranda saf, çözünür kolajen elde edilmiştir. Sıçan kuyruğu üzerindeki kıl kökleri temizlenmiş ve 4o C’deki dH2O ile dengelenmiştir. Daha sonra numune, kolajenöz olmayan maddelerden sodyum asetat tamponu ile arındırılmış ve ekstraksiyon aşaması için sodyum sitrat tamponu ile muamele edilmiştir. Elde edilen süpernatan, santrifüj filtrasyon tüpü ile saflaştırıldıktan sonra SDS PAGE tayin metodu kullanılarak kolajen varlığı gösterilmiştir. Jel görüntüleme sisteminde elde edilen görüntülerdeki bantlar üzerinde yürüme mesafelerinin ölçümleri yapılarak moleküler ağırlık standart eğrisi oluşturulmuştur. Yapılan literatür araştırması sonucu bant değerlerinin karşılıkları hangi zinciri temsil ettiği bulunmuş, standart eğrideki denklem aracılığıyla görünen bant değerleri, α1 (≅ 135 kDa), α2 (≅ 125 kDa), β (≅ 280 kDa), γ (≅ 300 kDa) olarak hesaplanmıştır. İki α, bir β ve bir γ zincirine sahip çözünebilir tip I kolajen elde edilmiştir. Sonuç olarak elde edilen kolajenin, birçok alanda katma değeri yüksek biyomedikal malzeme olarak kullanılabileceği öngörülmüştür.