Yazar "Sevgi, Ramazan" seçeneğine göre listele

Listeleniyor 1 - 1 / 1
  • Küçük Resim
    Öğe
    Koyun oositlerinin seçim kriterleri ve kültür ortamına göre in vitro gelişim düzeylerinin araştırılması
    (Selçuk Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, 2024) Sevgi, Ramazan; Çizmeci, Sakine Ülküm
    Sunulan çalışmada boyama yöntemi ve morfolojik yapılarına göre seçilen koyun oositlerinin maturasyon, fertilizasyon ve blastosist gelişim oranlarına drop hacmi ve oosit yoğunluğunun etkisinin belirlenmesi amaçlanmıştır. Sunulan çalışmanın laboratuvar uygulamaları UHAEM Müdürlüğü bünyesinde bulunan Embriyo Transferi laboratuvarında yürütüldü. Lokal mezbahadan alınan ovaryumlar antibiyotik içeren %0,9 fizyolojik tuzlu su içerisinde ve 25-30°C'lik sabit sıcaklık sağlayan termosta 2-3 saat içerisinde laboratuvara getirildi. Oositlerin maturasyonunda TCM-199, fertilizasyonunda BSOF, kültüründe ise SOF kullanıldı. Oositler; 2-8 mm çaplı antral foliküllerden 18-G kanül takılan 5 ml'lik enjektör kullanılarak aspire edildi. Alınan oositler rastgele iki gruba ayrıldı. Birinci gruptaki oositler Brilliant Cresyl Blue (BCB) ile boyandı. İkinci gruptaki oositler ise morfolojik yapılarına göre değerlendirildi. Boya alan oositler (BCB+) ve morfolojik değerlendirme sonunda A ve B kalitede olan oositler çalışmaya dahil edildi. Seçilen oositler, oluşturulan mikro damlacıklarda oosit/solüsyon hacim oranları; 1 adet /5 µl, 1 adet /10 µl, well of the well (WOW) kültür sisteminde bireysel ve 16 adet /100 µl grubunda toplu halde ve olacak şekilde in vitro maturasyon, fertilizasyon ve kültür aşamalarına tabi tutuldu. Mezbahadan getirilen 352 adet ovaryumdan 2-8 mm çapındaki foliküllerden toplam 1179 oosit aspire edildi. Elde edilen oositlerin 627'si BCB boyasına maruz bırakıldı ve bunların 367'si boya alırken (BCB+) 260'ı boya almadı (BCB-). Kalan 554 oosit ise morfolojik yapılarına göre sınıflandırıldı ve 393 adet oosit A ve B kaliteli olarak değerlendirildi. Çalışmada, boya alan 367 oosit (BCB+) ve A-B kalitedeki 393 oosit olmak üzere toplam 760 oosit kullanıldı. Hem morfolojik yapısına göre hem de BCB ile boyama sonrası değerlendirilen oositlere bütün aşamalarda aynı şartlarda IVP uygulamaları gerçekleştirildi. Yapılan analizde BCB ile seçilen oositlerde; IVM, IVF ve IVC sonuçları sırası %86,82; %64,57; %26,15 olarak gerçekleşirken morfolojik seçime göre yapılan değerlendirmede ise bu oranlar %83,20; %57,25; %21,37 olarak gerçekleşti ve gruplar arasında istatistiki farkın önemli olduğu tespit edildi. A ve B kalite oositler ile farklı büyüklükteki drop hacimlerine göre yapılan çalışmada ise maturasyon oranları sırası ile %84,86; %76,56; %84,37 ve %87,50; fertilizasyon oranları %73,46; %64,21; %69,73 ve %69,25 blastosist oranları ise %30,49; %16,21; %27,72 ve %28,54 olarak tespit edildi. Boyama yöntemi ile seçilen BCB+ oositlerde ise maturasyon oranları sırası ile %88,20; %79,91; %88,54 ve %90,62; fertilizasyon oranları %78,44; %67,80; %75,28 ve %74,84; blastosist oranları ise %34,33; %19,52; %30,85 ve %33,33 olarak tespit edildi. Her iki çalışmada da gruplar arasındaki fark istatistiki bakımdan anlamlı bulundu (P<0,05). Sonuç olarak, koyunlarda BCB boyası kullanılarak seçilen oositlerin, morfolojik yapısına göre seçilen oositlere göre in vitro embriyo üretiminin tüm aşamalarında daha iyi gelişim gösterdiği, oositler boyama işleminden zarar görmediği için subjektif değerlendirmeden daha yararlı bir araç olarak IVF çalışmalarında kullanılabileceği sonucuna ulaşıldı. Aynı zamanda sunulan çalışma ile koyunlarda in vitro embriyo üretiminde; hücrelerin maturasyon, fertilizasyon ve kültür ortamında 5 μl büyüklüğündeki droplarda bireysel olarak da gelişebileceği, grup kültürü ve WOW sistemi ile benzer oranlarda blastosist geliştirilebildiği belirlenmiştir.