Lactobacillus acidophilus ve Lactobacillus casei’nin, Metisilin dirençli ve metisilin duyarlı Staphylococcus aureus biyofilm genlerine in-vitro etkisinin incelenmesi

Amaç: Staphylococcus aureus’un icaA ve icaR genleri üzerinden düzenlediği biyofilm yeteneği, oluşturdukları enfeksiyonlar ile mücadeleyi zorlaştırmaktadır. Bu çalışmada, Lactobacillus acidophilus ve Lactobacillus casei’nin, metisilin duyarlı (MSSA) ve metisilin dirençli (MRSA) S. aureus suşlarının icaA ve icaR gen ekspresyonlarına etkisinin in-vitro olarak incelenmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: IcaA ve icaR gen ekspresyonlarının kontrolü için 6 tüp hazırlandı. 37oC’da %5 CO2’li ortamda inkübe edildi. İnkübasyonun 6., 12., ve 24. saatinde RNA izolasyonları yapıldı. cDNA sentezi sonrasında,icaA, icaR ve 16SrRNA genlerine spesifik primerler ile real-time PCR’la çalışıldı. Delta delta Ct yöntemine göre sonuçlar analiz edildi. Bulgular: S. aureus ATCC 43300 (MRSA) ve S. aureus ATCC 29213 (MSSA) icaA gen ve icaR ekspresyonları, L. acidophilus ve L. casei ile karşılaşma sonrası sırasıyla down regülasyon ve upregulasyon göstermiştir. 12. saat ve 24. saatte saptanan icaA ve icaR gen ekspresyon seviyelerinin hem MRSA hem de MSSA suşlarında benzer olduğu gözlenmiştir. Öneri: Sonuç olarak, çalışmamız, probiyotik etkili L. acidophilus ve L. casei suşlarının S. aureus suşlarının biyofilm etkinliklerini icaA ve icaR gen ekspresyonlarını real-time PCR yöntemi ile araştıran ilk çalışmadır. L. acidophilus ve L. casei’nin in-vitro ortamda MRSA ve MSSA suşlarını etkileyerek icaA ve icaR gen ekspresyonlarını değiştirebildikleri saptanmıştır. Probiyotik etkili bu suşların antibiyofilm özelliklerinin S. aureus enfeksiyonlarına karşı yeni bir mücadele seçeneği olabileceği düşünülmektedir.

Aim: Staphylococcus aureus’s biofilm ability which control via icaA and icaR gene is a serious problem in the treatment of infections. Aim of this study was to investigate in-vitro effects of important probiotic L. acidophilus and L. casei on the icaA and icaR genes expressions of the MRSA and MSSA strains. Materials and Methods: In this study, to determine the icaA and icaR gene expressions, 6 tubes in probiotics were prepared. Incubated at 37°C in 5% CO2 medium. RNA isolations were performed at the 6th, 12th, and 24th hours of incubation. After cDNA synthesis, real-time PCR with primers specific for icaA, icaR and 16S rRNA genes were studied. The results were calculated with delta delta Ct method. Results: S. aureus ATCC 43300 (MRSA) and S. aureus ATCC 29213 (MSSA) icaA gene and icaR gene expressions showed down regulation and upregulation respectively after encountering L. acidophilus and L. casei. The icaA and icaR gene expression ratios determined at 12 hours and 24 hours were found to be similar in both MRSA and MSSA strains. Conclusion: This study was the first study to investigate effect of L. acidophilus and L. casei strains on biofilm gene expression of the S. aureus strains by the real-time PCR method. It was determined that L. acidophilus and L. casei were able to alter icaA and icaR gene expression by affecting the MRSA and MSSA strains in-vitro. We believe that the antibiotic properties of these probiotic strains may be a new treatment option against S. aureus biofilm infections.