Protoplast Isolation in Lupin (Lupinus Mutabilis Sweet): Determination of Optimum Explant Sources and Isolation Conditions
Yükleniyor...
Dosyalar
Tarih
2000
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Effects of cultural factors on the yield, viability and division of protoplasts were investigated in Lupinus mutabilis Sweet containing a high protein content as well as a reasonable oil content which may make this species an alternative crop to soybean in Turkey. Explants from different in vitro seedling parts were evaluated on the suitability of protoplast isolation and viability. Leaf mesophyll was the most suitable tissue as a protoplast source. Pectinases as well as cellulases were essential for the isolation of protoplasts. Nine percent (w/v) mannitol was suitable to stabilise osmotic pressure together with low salt concentrations in washing and isolation solutions while 9% (w/v) glucose gave better results in culture medium. Shoot tip protoplasts exhibited a higher viability than other protoplast sources. Prolonged viability was observed when protoplasts were cultured in low density media. Techniques such as nurse cultures and electro-stimulation were ineffective. Sustained division of protoplasts in lupin (all sources) was not possible. However, techniques applied in this study may help other researchers, especially those studying protoplast culture of recalcitrant plant species, as well as further studies on this species.
Türkiye'de soya fasulyesine alternatif olabilecek yüksek bir protein oranı ile orta seviyede yağ oranına sahip bir lüpen türü olan Lupinus mutabilis sweet'in farklı kaynaklardan elde edilen protoplastlarında verim, canlılık ve bölünme üzerine değişik kültür şartlarının etkisi araştırılmıştır. In vitro şartlarda yetiştirilen çeşitli bitki parçalarının protoplast izolasyonuna uygunluğu değerlendirilmiştir. Yaprak mezofil hücreleri en uygun protoplast kaynağını oluştururken, izolasyonda hem pektinaz hem de selülaz grubu enzimlerin kullanılması gerekli bulunmuştur. Düşük tuz konsantrasyonu ile birlikte, %9 manitol hen izolasyon hem de yıkama solüsyonunda, en uygun osmotik basınç dengeleyici olurken, kültür ortamında 969 glikoz daha iyi sonuçlar vermiştir. Sürgün uçları en canlı protoplast kaynağını oluştururken, düşük yoğunlukta kültür protoplastların daha uzun süre canlı kalmasını sağlamıştır. Nörs kültürleri ve elektrik uyarımı gibi diğer teknikler sürekli bölünmede etkili olmamıştır. Bu çalışma, uygulanan teknikler açısından benzer konuda ve özellikle, protoplast izolasyonun zor olduğu bitki türleri ile bu türde çalışacak araştırıcılara ışık tutabilecektir.
Türkiye'de soya fasulyesine alternatif olabilecek yüksek bir protein oranı ile orta seviyede yağ oranına sahip bir lüpen türü olan Lupinus mutabilis sweet'in farklı kaynaklardan elde edilen protoplastlarında verim, canlılık ve bölünme üzerine değişik kültür şartlarının etkisi araştırılmıştır. In vitro şartlarda yetiştirilen çeşitli bitki parçalarının protoplast izolasyonuna uygunluğu değerlendirilmiştir. Yaprak mezofil hücreleri en uygun protoplast kaynağını oluştururken, izolasyonda hem pektinaz hem de selülaz grubu enzimlerin kullanılması gerekli bulunmuştur. Düşük tuz konsantrasyonu ile birlikte, %9 manitol hen izolasyon hem de yıkama solüsyonunda, en uygun osmotik basınç dengeleyici olurken, kültür ortamında 969 glikoz daha iyi sonuçlar vermiştir. Sürgün uçları en canlı protoplast kaynağını oluştururken, düşük yoğunlukta kültür protoplastların daha uzun süre canlı kalmasını sağlamıştır. Nörs kültürleri ve elektrik uyarımı gibi diğer teknikler sürekli bölünmede etkili olmamıştır. Bu çalışma, uygulanan teknikler açısından benzer konuda ve özellikle, protoplast izolasyonun zor olduğu bitki türleri ile bu türde çalışacak araştırıcılara ışık tutabilecektir.
Açıklama
Anahtar Kelimeler
Lupinus, protoplast, enzyme, leaf mesophyll, izolasyon, yaprak mezofili
Kaynak
Turkish Journal of Botany
WoS Q Değeri
Scopus Q Değeri
Cilt
24
Sayı
3
Künye
Babaoğlu, M., (2000). Protoplast Isolation in Lupin (Lupinus Mutabilis Sweet): Determination of Optimum Explant Sources and Isolation Conditions. Turkish Journal of Botany, 24(3), 177-185.
